İnsan Servikal Kanser Hela Hücrelerinde Vinorelbin'in Apoptotik Etkisi

Abstract

Amaç: Hücre hareketi, hücre bölünmesi, hücre içi madde taşınması, hücresel yapınınsağlanması gibi biyolojik işlevlerde rol alan mikrotübüller, antikanser ilaçların esashedefi konumundadır. Vinorelbin'in (Navelbin) mikrotübüller üzerinden etki gösterenmoleküllerden birisidir ve çeşitli kanserlerde kemoterapötik ajan olarak kullanılmaktadır.Çalışmamızda, insan serviks kanser hücre hattı olan HeLa hücrelerine, 24saat 5-100μM doz aralığında vinorelbin uygulaması sonunda hücrelerdeki olasıapoptotik etkisini belirlemeyi amaçladık.Gereç ve yöntem: Vinorelbin uygulanan HeLa hücrelerinde hücre canlılığı ve apoptotikoranları belirlemek için sırasıyla XTT canlılık analizi ve floresan mikroskobundahücrelerin karakteristik morfolojisi değerlendirildi. Vinorelbin uygulanan hücrelerde Bhücresi lenfoma 2 (BCL2) ve Siklin D1 (CCND1) genlerinin mRNA ifade düzeyleri dearaştırıldı.Bulgular: En yüksek vinorelbin konsantrasyonu olan 100μM'da hücre canlılığının 24saat sonunda %60'ın altına düştüğü belirlendi. Apoptotik oranın %17,6 olduğu 40μMdozda aynı zamanda nekrotik oranın da 80 ve 100μM dozlara oranla oldukça az olmasısebebiyle en etkili apoptotik doz olarak 40μM bulundu. Ayrıca 40μM vinorelbinuygulamasının anti-apoptotik özellikteki BCL2 ile proto-onkogen olan CCND1genlerinin mRNA ifade edilme düzeylerinde azalmaya neden olduğu saptandı.Sonuç: Mikrotübül dinamiğini etkileyerek antikanser özellik gösteren vinorelbin'inmoleküler düzeyde olası etki mekanizmalarının belirlenmesinin, kanser tedavisindedaha etkin yaklaşımların ortaya çıkmasında yardımcı olabileceği kanısındayız.Objective: Microtubules, having roles in many biological functions including cellmotility, cell division, intracellular transport, cellular architecture, are major targets foranticancer drugs. Vinorelbine (Navelbin) is one of the molecules that affectsmicrotubules and used as a chemotherapoetic agent in various cancers. In our study,we aimed to determine prospective apoptotic effect of the vinorelbine on humanservical carcinoma cell line HeLa cells at 24 hours between 5-100μM dose incubation.Material and Method: For this purpose, vinorelbine treated HeLa cells, were assessedby XTT viability analysis and fluoresence microscopy to determine cell characteristicmorphology. B cell lyphoma 2 (BCL2) and cyclin D1 (CCND1) genes' mRNA expressionlevels were also evaluated in vinorelbine applied cells Results: Cell viability was found to be below 60% for the highest vinorelbineconcentration (100μM) at the end of 24 hours incubation. Apoptotic ratio was found17.6% for the 40μM dose at the same time necrotic ratio was found lower than 80 and100μM doses. Therefore, the most effective apoptotic dose was found to be 40μM.Moreover, we detected that 40μM vinorelbine treatment caused a decrease in antiapoptoticBCL2 and proto-oncogene CCND1 genes' expression levels.Conclusion: We believe that determination of molecular mechanisms involvingvinorelbine which has anticancer properties by virtue of distrupting microtubuledynamics, may lead to development of more effective approaches in cancer treatment.