Arsenik toksisitesinin testiste oluşturduğu hasara karşı resveratrolün koruyucu etkilerinin incelenmesi

Abstract

AMAÇ Bu çalışmada arseniğin toksik etkilerine karşı sıçanlarda testis dokusunda resveratrolün yapısal, antiapopitotik ve oksidatif stres üzerine etkilerini incelemek amaçlanmıştır. YÖNTEM Çalışmada Wistar cinsi yetişkin erkek sıçanlar (200-300gr) kullanıldı. Sıçanlar 5 gruba ayrıldı: I. grup: Kontrol grubu. Arseniğe maruz kalmamış normal ad libitum beslenen grup (n=7). II. grup : Alkol grubu. Resveratrol alkol ile çözüleceğinden alkolün etkilerini görmek için oluşturulan grup (n=7). III. grup: Arsenik grubu. Oral gavage ile günlük 5mg/kg arsenik verilen grup (n=7). IV. grup : Arsenik + Resveratrol grubu. Oral gavage ile günlük 5mg/kg arsenik verilen ve oral gavage ile günlük 10 mg/kg Resveratrol ile tedavi edilen grup (n=7). V. grup: Arsenik + Resveratrol grubu. Oral gavage ile günlük 5mg/kg arsenik verilen ve oral gavage ile günlük 20 mg/kg Resveratrol ile tedavi edilen grup (n=7). Tüm gruplar için deney süresi 28 gün olarak belirlendi. Deney sonunda biyokimyasal olarak malondialdehit (MDA), glutatyon (GSH) ve apopitozu göstermek için TUNEL ve Caspase 3 yöntemi kullanıldı. Yapısal değişiklikler için ışık mikroskobik ve elektron mikroskobik incelemeler yapıldı. Gruplar arasındaki farklar one-way ANOVA posthoc LSD testi ile gösterildi. p BULGULAR Kontrol grubuna göre arsenik grubu MDA değerleri anlamlı olarak yüksek bulundu. GSH değerleri arsenik grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak düşük bulundu. Işık mikroskobik ve elektron mikroskobik olarak yapılan incelemelerde arsenik grubu seminifer tübüllerinde vakuolizasyon, atrofi, germ hücre dejenerasyonu, tübül lümeninde debris gözlendi. Yapılan immünohistokimyasal incelemeler sonucu arsenik grubu seminifer tübüllerinde kontrol grubuna oranla TUNEL(+) hücre sayısının ve Caspase 3 immunoreaktivite gösteren hücre sayısının arttığı, resveratrol ile tedavi edilen gruplarda ise sayının azaldığı gözlendi. SONUÇ Sonuç olarak bu çalışmada arseniğin toksik etkilerine karşı testis dokusu üzerinde resveratrolün koruyucu etkisi ilk kez gösterilmiştir. Resveratrol, antioksidatif etkisi aracılığıyla antiapopitotik etki gösterebilmektedir. Anahtar kelimeler: Arsenik, testis, resveratrol, apopitoz, oksidatif stres Purpose In this study we aimed to investigate protective effects of resveratrol on arsenic induced toxicity, apoptosis and oxidative stress on testis. Material-Method In this study, adult male Wistar rats (200-300 gr) were used. Rats were divided in five groups. Group I: Conrol group: Non- arsenic group, rats were fed ad libitum (n=7). Group II: Alcohol group: Because of resveratrol was soluable in alcohol, to see the effects rats were given alcohol by intragastric rout (n=7). Group III: Arsenic group: Rats were given 5mg/kg/day arsenic by intragastric route. Group VI: Arsenic+Resveratrol group: Rats were given 5mg/kg/day arsenic and 10mg/kg/day resveratrol by intragastric route (n=7). Group V: Arsenic+Resveratrol group: Rats were given 5mg/kg/day arsenic and 20mg/kg/day resveratrol by intragastric route (n=7). Experimental process was chosen 28 days for all groups. After the experimental process, oxidative stress marker malondialdehid (MDA), antioxidant enzyme glutathione (GSH) and TUNEL and Caspase 3 immunohistochemistry for apoptosis were examined in each group. Light microscobic and electron microscobic observations were used for ultrastructual changes. All data were analyzed by one-way ANOVA posthoc LSD test. p Results MDA levels in arsenic group showed a significant increase compare with control group. GSH levels were significantly lower than those control group. Light microscobic and electron microscobic investigations showed that on arsenic tissues, seminifer tubules showed vacuolization, atrophy, germ cell degeneraion and celluar debris on tubul lumens. After immunohistochemical investigations apopitotic cell death was increased in arsenic group compared with control group. Resveratrol decreased TUNEL(+) cells and caspase 3 immnunostaining showed no increased apoptosis on treated groups compared with arsenic group. Conclusion In conclusion, the protective effects of resveratrol on arsenic induced toxicity on testis was demonstrated firstly in the present study. Resveratrol exhibits antiapopitotic effect via with its antioxidant properties. Key words: Arsenic, testis, resveratrol, apopitosis, oxidative stress